二阶导数示波极谱检测人血清中NO2-含量方法的建立

目的 NO2-是NO在体内的代谢产物之一,直接测定NO2-含量更能反映血清中NO含量的真实情况.本实验则建立一种直接测定人血清中NO2-含量的方法——阶导数示波极谱法.方法 采用对氨基苯磺酸和8-羟基喹啉为测定体系,使用二阶导数示波极谱测定血清中的NO2-含量.结果 该方法的检出限为9.6×10^-3 μg·ml^-1,线性范围为0.05～66.7 μg·ml^-1,精密度为4.91％,平均回收率为102.6％.结论 二阶导数示波极谱法测定人血清中NO2-含量是一种灵敏、准确、重复性好、试剂安全的方法.     

管花肉苁蓉花中二氢黄酮醇4-还原酶的克隆、表达分析和酶活性鉴定

二氢黄酮醇4-还原酶(dihydroflavonol 4-reductase, DFR)是花色素苷生物合成途径的关键酶,在植物花色调控中发挥重要作用。本研究通过管花肉苁蓉花转录组数据分析,利用RT-PCR技术克隆出一条DFR基因并命名为CtDFR,其开放阅读框(ORF)长1 263 bp,编码420个氨基酸,蛋白分子质量为47.5 kDa。序列分析表明CtDFR具有NADPH结合域和底物特异性结合域。实时荧光定量PCR表明CtDFR在管花肉苁蓉的红、紫色花中高表达,相对表达量分别是白色花的4.04、19.37倍。构建原核表达载体pET-28a-CtDFR,转入大肠杆菌BL21 (DE3)菌株中,成功表达CtDFR蛋白,纯化得到可溶性重组蛋白。体外酶活性分析表明,重组蛋白CtDFR能催化二氢山柰酚、二氢槲皮素、二氢杨梅素生成无色天竺葵素、无色矢车菊素、无色飞燕草素。亚细胞定位实验结果表明CtDFR主要定位于细胞质中。本研究结果表明CtDFR在管花肉苁蓉花色调控中起到重要作用,为进一步探讨管花肉苁蓉花色形成及调控机制研究奠定了基础。     

堇菜属植物的化学成分及药理作用研究进展北大核心CSCD

堇菜科堇菜属Viola植物全球现存500余种,约有111种在我国广泛分布,且药用历史悠久,品种繁多。笔者统计目前已从该属植物中共分离并鉴定410个化合物,涵盖黄酮类、萜类、苯丙素类、有机酸类、含氮类、甾醇类、糖类及其衍生物、挥发油类、环肽类等,药理作用主要涉及抗菌、抗炎、抗病毒、抗氧化、抗肿瘤等。该文系统综述了国内外堇菜属植物的化学成分和药理活性研究进展,为其进一步深入研究和临床应用提供科学依据。     

中医异病同治理论治疗多器官纤维化的科学基础评述

异病同治是中医辨证论治体系的重要内容,应用这一理论治疗多器官纤维化具有重要意义。为揭示器官纤维化、硬化的实质及为中医药防治难治性疾病开拓新途径。从异病同治的内涵、中医及现代科学理论基础、单味中药防治多器官纤维化实验研究方面探究多脏器纤维化共同的发病机制,阐述异病同治理论的科学内涵,为促进中西医结合,推动中医药现代化进程具有重要意义。     

蒙医常用524首方剂处方的用药规律

目的：探讨蒙医常用方剂处方的用药规律。方法：收集、整理、筛选《中华人民共和国卫生部药品标准·蒙药分册》《中国医学百科全书·蒙医学》《传统蒙药与方剂》《蒙医方剂学》（蒙文版蒙医教材）中的常用蒙医方剂,从剂型、方剂类型、用药频次、药物分类、性味、药效等角度进行频次统计、关联规则与聚类分析,探讨其处方用药规律。结果：共筛选出524首蒙医常用方剂;最常用剂型为散剂;五脏类方为主要方剂类型;高频药物依次为诃子、红花、栀子等;药物分类中祛巴达干药物使用频次最高,占比16.36%,其次为清热类药物、镇赫依类药物等;药性以凉性为主,占43.33%;药味以苦味为主,占45.55%;药物效能中轻性频次最高,占41.39%,其次为钝、燥、糙等;19个高频药对中有13个涉及镇赫依类药物,9组核心药物内“川楝子→栀子”的置信度最高;系统聚类得出6个药物组合,包括4个凉性组合、2个温性组合。结论：蒙医方剂善用散剂,重治五脏,习用诃子;围绕“六基症”对“证”组方;习用性凉,味苦,效轻、锐、燥、糙之药,常用对药以镇赫依类药物为主,置信度最高的核心药物组合为“川楝子→栀子”;聚类组合以凉性为主,与药性结果互为验证。     

再灌注治疗对急性心肌梗死患者血浆外泌体微小RNA差异表达的影响

目的 观察冠状动脉再灌注治疗对急性心肌梗死(AMI)患者血浆外泌体微小RNA(miRNA,miR)差异表达的影响。方法 选取2022年10月至11月于深圳市龙岗区第三人民医院确诊的3例老年男性AMI患者,进行冠状动脉再灌注治疗,留取患者入院时、术后2 h和术后24 h静脉血,应用miRNA测序技术筛选3例患者血浆外泌体中共同差异表达miRNA后,对其靶基因进行生信分析,利用定量聚合酶链反应验证其中差异表达的miR-499a-5p。结果 与入院时比较,术后2 h血浆外泌体miRNA有418个上调和406个下调,术后24 h血浆外泌体miRNA有320个上调和225个下调(P<0.05);与术后2 h比较,术后24 h血浆外泌体miRNA有344个上调和350个下调(P<0.05)。Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes富集分析显示,差异表达的miRNA富集在磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B、缺氧诱导因子1和血管平滑肌收缩等通路。Gene Ontology富集分析显示,差异表达的miRNA靶基因分子功能方面主要富集于蛋白结合和DNA结合;...     

蒙药额尔敦-乌日勒对心肌损伤的修复作用及机制探讨

目的:观察蒙药额尔敦-乌日勒对斑马鱼心脏损伤后再生作用及其可能作用机制,验证其治疗的有效性,为进一步研究蒙药额尔敦-乌日勒提供实验依据。方法:利用转基因鱼系Tg(vmhc:mCherry-NTR)经甲硝唑(MTZ)处理后建立心室损伤模型,把90只受精3 d(3 dpf, days post fertilization)的斑马鱼胚胎随机分为对照组(DMSO,n=30)和心肌消融组(MTZ,n=30)以及心室损伤后额尔敦-乌日勒治疗组(MTZ+EW,n=30),治疗组在MTZ处理后24 h(24 hpt, 24 hour post treatment)用蒙药额尔敦-乌日勒混悬液以25μg/mL治疗。3组在72 hpt检测细胞增殖,用共聚焦显微镜观察细胞增殖情况并定量分析,同时应用RT-qPCR分析一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)的表达量。结果:治疗组斑马鱼胚胎经过蒙药额尔敦-乌日勒治疗后,心肌损伤后的再生修复比例明显上升,且再生心肌细胞的增殖速度较对照组加快、炎症因子表达量明显...     

不同地区医院ICU碳青霉烯类抗生素使用强度和耐碳青霉烯革兰阴性杆菌分离的相关性分析

目的 探讨不同地区两家三甲医院重症医学科（ICU）碳青霉烯类抗生素使用强度和耐碳青霉烯革兰阴性杆菌相关性,为抑制ICU耐药菌分离株数上升提供解决方法。方法 收集2020年1月-2021年12月内蒙古自治区人民医院、河北省人民医院ICU 4种碳青霉烯类抗生素使用强度和耐碳青霉烯革兰阴性杆菌菌株分离数。使用时间序列模型对耐碳青霉烯革兰阴性杆菌进行时间序列预测分析以及对其和碳青霉烯类抗生素相关性进行Spearman检验统计分析。结果 内蒙古自治区人民医院ICU碳青霉烯类抗生素使用强度与碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌（CRPA）分离株数成负相关（r=-0.626,P=0.038）,与碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌（CRKP）分离株数成正相关（r=0.562,P=0.044）;亚胺培南西司他丁钠使用强度与碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌（CRAB）分离株数成正相关（r=0.609,P=0.011）。河北省人民医院ICU厄他培南使用强度与CRAB分离株数成负相关（r=-0.724,P=0.044）,碳青霉烯类抗生素、亚胺培南西司他丁钠和美罗培南使用强度均与CRKP分离株数成负相关（r=-0.724、-0.689、-0...     

藏族药小叶莲化学成分和药理作用研究进展

小叶莲Sinopodophylli Fructus是藏族习用药材,具有调经活血功效。目前从小叶莲中分离鉴定的化学成分主要有木脂素类(15种,如鬼臼毒素、去氧鬼臼毒素、4′-去甲鬼臼毒素等)和黄酮类(20种,如槲皮素、山柰酚、芦丁等),具有抗肿瘤、抑菌、降血脂等药理作用;另外,还含有蛋白质、脂肪酸、多糖、维生素、氨基酸、微量元素等其他成分。该文根据国内外文献报道,总结并综述了小叶莲中化学成分和药理作用方面的研究进展,以期为小叶莲资源的开发及临床合理应用提供参考。     

内皮素1和BQ-123对自发性高血压大鼠动脉平滑肌细胞腺苷三磷酸酶活性及mRNA表达的影响

目的 观察内皮素1及其受体拮抗剂BQ-123对自发性高血压大鼠及Wistar-Kyoto(WKY)大鼠动脉平滑肌细胞膜腺苷三磷酸酶(ATPase)活性及其mRNA表达的影响.方法 组织块种植法培养自发性高血压和WKY大鼠胸主动脉平滑肌细胞.以WKY大鼠为对照,采用生化酶学方法和逆转录聚合酶链反应,观察不同浓度的内皮素1 (10-7、10-8、10-9 mol/L)及其受体拮抗剂BQ-123(10-6、10-7、10-8 mol/L)对自发性高血压大鼠动脉平滑肌细胞膜Na+,K+-ATPase、Ca2+-ATPase活性及mRNA表达的影响.结果 内皮素1能减弱自发性高血压大鼠动脉平滑肌细胞两种ATPase活性(P<0.01)及膜钙ATP酶亚型1(PMCA1)表达(P<0.01).BQ-123能部分逆转内皮素1所致两种ATPase活性减弱(P<0.01)及PMCA1表达下调(P<0.01),而内皮素1对Na+,K+-ATPase α1- 亚单位mRNA表达水平无明显改变(P>0.05).结论 内皮素1抑制Na+,K+-ATPase、Ca2+-ATPase活性,可能是通过ETA受体途径介导,且其对Ca2+-ATPase活性的影响可能发挥在转录水平.BQ-123通过阻断ETA受体逆转内皮素1对自发性高血压大鼠Na+,K+-ATPase、Ca2+-ATPase活性的影响.